中国三农资讯信息门户网站
村网通【全国村网通工程】农村自助建站管理系统

  蛭弧菌是一种具有类似噬菌性质的细菌,但它不是噬菌体,更不是细菌。它对弧菌有较强的裂解作用,是水产养殖中主要病菌“弧菌”的天敌。

  近两年,蛭弧菌产品的使用突然火了起来,市面上也出现了各式各样的蛭弧菌产品,有液体蛭弧菌,有粉剂蛭弧菌,还有蛭弧菌冻干粉,尤其是蛭弧菌冻干粉成了推广的新潮流,同样都是蛭弧菌冻干粉,有的产品用的很好,有的产品用了却见不到效果,很多养殖户甚至厂家都对蛭弧菌相关产品抱有疑问,本文通过对蛭弧菌知识的初步梳理,为养殖户、经销商、公司更好地理解、使用蛭弧菌产品提供一些思路。

  蛭弧菌也叫噬菌蛭弧菌,属于细菌界变形细菌门蛭弧菌科蛭弧菌属,具有细菌的一切形态特征:

  单细胞,弧形或逗点状,有时呈螺旋状。0.3-0.6×0.8-1.2微米,或仅为杆菌长度的1/3-1/4,端生鞭毛,比其他细菌的鞭毛粗3倍~4倍,与鞭毛相对的一端有钉状纤毛,被称为“感染锥子”,与菌体的识别和吸附宿主有关。其运动活跃,革兰氏染色阴性。

  蛭弧菌比通常的细菌要小,能通过细菌滤器,所以普通的显微镜是看不到它的,至少要用到油镜,甚至需要染色才行。在相差显微镜下,可见蛭弧菌呈跳跃式的运动;电镜观察,蛭弧菌以弧、杆状为主。因为小,低于2万转的离心机对蛭弧菌的浓缩是没有意义的,而2万转的离心机一般是实验室才会配备。

  蛭弧菌有寄生型,也有兼性寄生,极少数营腐生。非寄生型营腐生生活,可在蛋白胨和酵母提取物培养基上生长繁殖。从自然界分离得到的蛭弧菌都是依赖寄生型,迄今为止,还没有直接从自然界分离得到非寄生型。

  寄生型蛭弧菌生长,一般要求pH6.0-8.5;温度23℃~37℃,低于12℃,高于42℃时均不生长;能稳定分解蛋白质,一般不利用碳水化合物,而以肽、氨基酸作碳源和能源;能液化明胶;严格好氧。

  温度不在适宜范围的时候,蛭弧菌是不生长的,所以使用时要充分考虑这一点。比如3月、4月份用它泡苗,效果肯定不好,如果改成拌料投喂,会对肠道控菌产生积极影响。

  蛭弧菌的繁殖需要氧气,使用的时候也建议在早上8点~10点使用,这样可以获得较为充足的溶氧。另外,其耗氧不会达到非常剧烈的程度,因为其繁殖代时一般要4小时~6小时。

  蛭弧菌与宿主细胞之间,常表现出一定的特异性。不过,有的特异性较差,能侵入多种细菌。例如不同的蛭弧菌菌株,能侵入各类不同的植物病原菌。

  从这一点上看,其比噬菌体(病毒)、细菌素(蛋白质)的广谱性要好。实际上蛭弧菌可感染许多不同科属的菌,但其总体上有一定偏向性,比如其可感染大多数革兰氏阴性细菌(如志贺氏菌属、沙门氏菌属、埃希氏菌属、欧文氏菌属、变形杆菌属、弧菌属、假单胞菌属、钩端螺旋体等微生物),但只对少数的革兰氏阳性(如粪链球菌、乳酸菌等)细菌感兴趣,比如其不裂解枯草杆菌,同时也有报道指出其对某些真菌和肠道病毒也有一定的裂解活性。

  寄生的特异性也对实际使用方法有很大的影响,即蛭弧菌是不是不管好菌坏菌都会攻击?如果是这样的话,那么很难被我们所用了,实际上,其有一定倾向性,这就给实际的应用提供了更多的可能性。

  华南理工大学郭衍彪郭衍彪(2016年)的研究指出,蛭弧菌BDW03对试验组大菱鲆肠道没有控制作用的菌属为8个(占53.3%),这8个菌属中多为革兰氏阳性菌属(6/8)。另外,其通过乳酸菌拌食饵料和泼洒BALOs喂食大菱鲆60小时后,乳酸菌和BALOs对大菱鲆肠道菌群中革兰氏阴性菌的控制作用(分别占总菌属的33.3%和26.7%)优于对革兰氏阳性菌的控制作用(分别占总菌属的26.7%和20.0%)。这也间接指出了蛭弧菌对细菌的裂解可能有一定的偏向性。

  上海水产大学生命科学与技术学院徐琴等人(2009)的研究指出,加噬菌蛭弧菌和黏红酵母组的试验效果不理想,表明这两株菌体之间有一定的拮抗作用。而联合使用噬菌蛭弧菌和球形红假单胞菌(是紫色非硫光合细菌红假单胞菌属的一个种)组展示了净化水质,预防病害的优良前景,此组能有效地吸收氨氮、硫化物等有害物质。这也指出了蛭弧菌是直接可以和某些光合细菌直接混合使用的,这一点大大提高了使用的方便性。

  再加上其他专家的一些总结,基本上蛭弧菌更偏向于革兰氏阴性杆菌,同时从即有的论文得知,其最好不要用酵母混用,但蛭弧菌可以和光合细菌混用,建议最好分开使用。同时还有一个关键点,即在一个20天的周期内,蛭弧菌对水体的调控作用能达到近2周时间。

  蛭弧菌要用双层平板而不用单层平板法检测,主要原因在于培养皿底部并不是十分平整,因此注入少量培养基铺平底部作为下层,会获得几近水平的底部,然后在上面将噬菌体和细菌混合物的培养基(比较薄)注入作为上层,这样使得观察物在同一平面,更利于噬菌斑的观察及分离纯化。

  扬州大学王亚丽(2007年)的研究指出,将蛭弧菌分离株BD5W以107pfu/mL浓度给小鼠灌胃,试验组和对照组均健康,证明噬菌蛭弧菌对小鼠没有毒性作用。

  江苏省泰州市海陵区畜牧兽医站徐懿(2011年)在噬菌蛭弧菌BD57的急性毒性试验研究指出,根据《兽药试验技术规范汇编》的要求选用小白鼠进行了急性毒性试验。分别采用灌胃和腹腔注射法进行了急性毒性试验,试验结果表明,噬菌蛭弧菌BD57对小鼠没有毒性作用。

  华南理工大学陈丽芸(2012年)的研究也指出,至今没有发现蛭弧菌对真核细胞有毒的报道,对小白鼠、豚鼠、家兔等动物无毒性作用,对猴肾、Hela细胞组织培养也未引起细胞病变。迄今为止,相关报道表明蛭弧菌对人和某些动物无毒害作用。

  蛭弧菌对于宿主菌的裂解过程一般分为五个步骤:识别、吸附与侵入、定位与合成、复制、裂解。

  识别:在这个过程中,有趣的是蛭弧菌可以通过鞭毛实现跳跃式的运动,而向宿主菌快速移动,其是通过无鞭毛一端粘附于宿主菌表面的。鞭毛在这里起到了非常重要的作用,实际上,在一些发酵的试验研究过程中也发现,如果发酵罐内的浆叶转速过快,对鞭毛有损伤的话,蛭弧菌就无法再攻击宿主。

  吸附与侵入:为了实现吸附与侵入这个目的,蛭弧菌菌体会以100转/秒以上的速度产生一种机械“钻孔”效应,加上蛭弧菌入侵时的收缩从而进入宿主菌的周质空间。

  定位与合成:一是蛭弧菌会脱掉鞭毛,二是宿主菌会变成蛭质体。

  复制:蛭弧菌在这个阶段实现了复制繁殖。裂解:在最后一个过程中,蛭弧菌会合成鞭毛,裂解宿主的细胞膜,释放出所有蛭弧菌。

  蛭弧菌有五种保存方法,其中以冷冻干燥法保藏效果最好,1个月的复活率为100%,其次为4℃营养肉汤液保藏法和-20℃甘油保藏法,17个月复活率均为67%。有一点要明确,其冷冻干燥完成之后,是在4℃环境中进行保存的。

  蛭弧菌的使用方法,特别推荐在所有甲壳类养殖动物(小龙虾、螃蟹、白虾等)脱壳期之前使用,达到无刺激生物消毒这个效果。

  脱壳期是这些养殖动物特别脆弱的时期,容易感染相关疾病,尤其是温度升高的时候更是如此;另外,在脱壳期,甲壳类动物特别敏感,很多消毒剂是不能使用的,而蛭弧菌则可以做到安全无刺激;使用上,建议提前2天左右使用,如果能先使用一些补钙产品之后再使用蛭弧菌那就更好了,因为一定量的钙离子可以促进蛭弧菌的繁殖。

  推广“配合化学消毒剂治疗疑难杂症”。到了养殖中后期,在温度高的时候,有些疾病非常难以治疗,主要的特点是止不住、易反复,这个原因主要在于化学消毒剂虽然具备了快速杀菌的效果,但其反弹也非常迅速,一般普通的化学消毒剂或者国标抗生素,使用后24小时~48小时,水体的总菌数甚至弧菌数可能比用前还要高,这可能是难以治疗的主要原因。

  为了让杀菌即迅速又持久,必需结合使用化学消毒剂和蛭弧菌。首先使用化学消毒剂对水底、水面进行综合消毒,同时内服国标抗生素进行体内消毒,在见到效果之后,再连续使用1次~2次蛭弧菌,就可以看到明显不同的治疗效果。因为化学消毒剂起到了快速压制的效果,而蛭弧菌则起到了长期压制有害菌的效果,强强联合,能有效抑制有害菌的繁殖。

  在使用过硫酸氢钾底改片后,第二天可以大剂量使用有益菌,此时建议使用蛭弧菌和光合细菌一起混合使用,这一点已通过试验证明是可行的。也可以按20天一个周期,先行使用光合细菌,一周后再使用蛭弧菌原装冻干粉,也能达到比较好的使用效果。

  蛭弧菌主要针对大肠杆菌引起的相关肠炎疾病,因为在发酵蛭弧菌之前,必需先行生产大肠杆菌,再将蛭弧菌接种进去,大肠杆菌是蛭弧菌最为喜爱的细菌之一,因此其治疗此类肠炎效果会更好一些。另外,蛭弧菌本身就是一个宝库,其蛋白质含量丰富,可达细胞干重的60%~65%,DNA的含量为5%。

相关阅读

  • 为您推荐

科技育苗促增收

2018-11-12

11月10日,永泰县丰园蔬菜育苗有限公司技术人员毛有仓(右)在观察蔬菜种苗的生长情况。 近年来,福建省永泰县盘谷乡以土地流转的方式进

棉铃虫显性抗性突变被找到

2018-11-07

  在一场农民和棉铃虫之间无休止的战争中,棉铃虫通过适应基因工程来反击。  日前,发表在《美国国家科学院院刊》上的一项新研究发现了

科技为粮食安全保驾护航

2018-10-19

  近日,中央农办主任、农业农村部部长韩长赋表示,今年我国粮食产量有望继续保持在12000亿斤以上。特别是小麦和稻谷两大口粮品种产量基

院士“秘籍”让萝卜白菜茁壮成长

2018-10-18

  刘大响院士、钟南山院士、李依依院士……这些在各自研究领域颇有建树的专家们还有一个共同的身份——院士专家工作站进站院士。  院士...

“天空地”遥感技术助力精准农业

2018-10-10

  传统农业田间管理要看天看地看作物,而随着科技的进步,农民也要成为看手机的低头族。记者从9月26日在黑龙江现代农业示范区召开的天空

 

本文来源:中国农业电商网,未经书面授权,禁止转载,本网转载并注明其他来源的作品,并不代表本网认同和证实内容的真实性,如侵权请及时联系我们,我们24小时内予以删除!